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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見的生物性污染有哪些

更新時(shí)間:2025-09-24      點(diǎn)擊次數(shù):204

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見的生物性污染主要包括以下幾類:


類別典型代表主要特征與危害
細(xì)菌污染大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、假單胞菌等培養(yǎng)基在 48?72?h 內(nèi)出現(xiàn)渾濁、pH 下降,顯微鏡下可見球形、桿形或鏈形細(xì)菌;會(huì)迅速抑制細(xì)胞增殖甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡
真菌污染(酵母 + 霉菌)酵母菌、念珠菌、曲霉等初期培養(yǎng)液仍保持清亮,隨后出現(xiàn)絲狀或絮狀漂浮物;顯微鏡下可見出芽球或分枝絲體;生長(zhǎng)速度快,難以挽救已被污染的細(xì)胞
支原體(Mycoplasma)支原體肺炎支原體等體積極小(0.1?0.3?µm),不被常規(guī)抗生素殺死,肉眼難以發(fā)現(xiàn);會(huì)改變細(xì)胞代謝、形態(tài)和基因表達(dá),長(zhǎng)期影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
病毒污染嗜血病毒、腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等體積極?。ā?.05?0.1?µm),光學(xué)顯微鏡不可見;常通過(guò)血清、細(xì)胞系或?qū)嶒?yàn)人員引入;可導(dǎo)致細(xì)胞基因組不穩(wěn)定、死亡或?qū)嶒?yàn)數(shù)據(jù)失真
原蟲(Protozoa)阿米巴、鞭毛蟲等在顯微鏡下可見活動(dòng)的單細(xì)胞或多細(xì)胞體;大量增殖會(huì)直接吞噬或競(jìng)爭(zhēng)細(xì)胞養(yǎng)分,導(dǎo)致細(xì)胞死亡
黑膠蟲(Nematodes)黑膠蟲幼蟲等可穿透濾膜,低倍鏡呈黑點(diǎn)狀,高倍鏡可見小蟲游動(dòng);常來(lái)源于血清或動(dòng)物組織,雖不一定使培養(yǎng)液渾濁,但會(huì)干擾細(xì)胞形態(tài)觀察
交叉污染(非細(xì)胞生物污染)其他細(xì)胞系的混入、細(xì)胞系誤認(rèn)由于操作不規(guī)范或共享培養(yǎng)基/試劑導(dǎo)致;會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果被錯(cuò)誤細(xì)胞系掩蓋,常需通過(guò) DNA 指紋或 STR 鑒定排查


補(bǔ)充說(shuō)明

  • 以上七類是目前文獻(xiàn)中最常提及的細(xì)胞生物污染。

  • 除了上述微生物,還可能出現(xiàn) 內(nèi)毒素、增塑劑等化學(xué)污染

  • 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見的生物性污染有哪些

防控要點(diǎn)(簡(jiǎn)要)

  1. 嚴(yán)格無(wú)菌操作:使用經(jīng)濾的培養(yǎng)基、血清,操作時(shí)佩戴無(wú)菌手套、口罩,避免說(shuō)話、咳嗽。

  2. 定期檢測(cè):顯微鏡觀察、細(xì)菌/真菌培養(yǎng)、支原體 PCR、病毒檢測(cè)試劑盒等。

  3. 使用高質(zhì)量試劑:采購(gòu)經(jīng)認(rèn)證的無(wú)菌血清、培養(yǎng)基,必要時(shí)進(jìn)行熱滅活或過(guò)濾。

  4. 防止交叉污染:不同細(xì)胞系分開培養(yǎng)、使用獨(dú)立的培養(yǎng)器具、定期進(jìn)行細(xì)胞系鑒定。

了解并及時(shí)識(shí)別這些生物污染類型,是保證細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)可靠性和可重復(fù)性的關(guān)鍵。



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